Ảnh hưởng của các chất bổ sung hữu cơ lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài (Paphiopedilum callosum) nuôi cấy in vitro
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã sử dụng các chồi lan Vân Hài (Paphiopedilum callosum) in vitro được nuôi cấy tại Phòng Sinh học Phân tử và Chọn tạo giống cây trồng, Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên làm nguồn mẫu ban đầu. Các chồi lan Vân Hài có 3 lá và chiều dài lá 2 cm được nuôi cấy trên các môi trường có bổ sung các chất bổ sung hữu cơ khác nhau bao gồm nước dừa non, nước vo gạo, bột khoai tây, bột chuối và peptone nhằm tìm ra chất bổ sung hữu cơ thích hợp cho quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài đồng thời tạo ra được cây giống khỏe mạnh và góp phần làm hạ giá thành cây giống. Kết quả cho thấy có sự khác biệt trong quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài trên 5 môi trường. Trong đó, môi trường có bổ sung 200 ml/l nước vo gạo là tốt nhất thể hiện qua quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi sau 90 ngày nuôi cấy. Mặt khác, thay thế các chất bổ sung hữu cơ như, bột khoai tây (100 - 200 g/l), bột chuối 100 g/l hoặc peptone 1 g/l thay thế cho nước dừa non trong môi trường nuôi cấy sẽ làm giảm được giá thành cây giống và vẫn đảm bảo chồi lan Vân Hài sinh trưởng và phát triển tốt.
Trang 1
Trang 2
Trang 3
Trang 4
Trang 5
Trang 6
Trang 7
Trang 8
Trang 9
Trang 10
Tải về để xem bản đầy đủ
Tóm tắt nội dung tài liệu: Ảnh hưởng của các chất bổ sung hữu cơ lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài (Paphiopedilum callosum) nuôi cấy in vitro
Tạp chí Khoa học và Công nghệ 52 (1) (2014) 49-62 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT BỔ SUNG HỮU CƠ LÊN QUÁ TRÌNH SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA CHỒI LAN VÂN HÀI (PAPHIOPEDILUM CALLOSUM) NUÔI CẤY IN VITRO Vũ Quốc Luận1, Trịnh Thị Hương1, Nguyễn Phúc Huy1, Đỗ Khắc Thịnh2, Dương Tấn Nhựt1,* 1Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam *Email: duongtannhut@gmail.com Đến Toà soạn: 25/9/2013; Chấp nhận đăng: 15/1/2014 TÓM TẮT Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã sử dụng các chồi lan Vân Hài (Paphiopedilum callosum) in vitro được nuôi cấy tại Phòng Sinh học Phân tử và Chọn tạo giống cây trồng, Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên làm nguồn mẫu ban đầu. Các chồi lan Vân Hài có 3 lá và chiều dài lá 2 cm được nuôi cấy trên các môi trường có bổ sung các chất bổ sung hữu cơ khác nhau bao gồm nước dừa non, nước vo gạo, bột khoai tây, bột chuối và peptone nhằm tìm ra chất bổ sung hữu cơ thích hợp cho quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài đồng thời tạo ra được cây giống khỏe mạnh và góp phần làm hạ giá thành cây giống. Kết quả cho thấy có sự khác biệt trong quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài trên 5 môi trường. Trong đó, môi trường có bổ sung 200 ml/l nước vo gạo là tốt nhất thể hiện qua quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi sau 90 ngày nuôi cấy. Mặt khác, thay thế các chất bổ sung hữu cơ như, bột khoai tây (100 - 200 g/l), bột chuối 100 g/l hoặc peptone 1 g/l thay thế cho nước dừa non trong môi trường nuôi cấy sẽ làm giảm được giá thành cây giống và vẫn đảm bảo chồi lan Vân Hài sinh trưởng và phát triển tốt. Từ khóa: chất bổ sung hữu cơ, bột khoai tây, lan Vân Hài, nước dừa non, nước vo gạo. 1. GIỚI THIỆU Lan Vân Hài (Paphiopedilum) là một trong những loài hoa lan đẹp, phân bố từ Himalaya, Indonesia, Philippine và quần đảo Bougainville; trong đó, khu vực biên giới Việt Nam - Trung Quốc là một trong những cái nôi của lan Vân Hài. Lan Vân Hài rất đa dạng về kích cỡ, hình dáng và màu sắc [1]. Chúng rất thích hợp để trang trí trong nhà cũng như những khu vực trồng và trang trí cây cảnh. Với phương pháp nhân giống hiện nay, nước dừa thường được bổ sung vào môi trường nuôi cấy nhằm làm tăng chất lượng của cây giống. Việc sử dụng nước dừa non không phải lúc nào cũng gặp thuận lợi vì phải phụ thuộc vào mùa và giá nước dừa non là 25.000 – 30.000 đ/l. Chính vì vậy, chi phí cho quá trình nuôi cấy để tạo được một cây con in vitro hoàn chỉnh là rất cao. Trong các môi trường nuôi cấy phong lan, bên cạnh các thành phần muối, Ảnh hưởng của các chất b/s hữu cơ lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài 50 vitamin, nguồn carbon và chất điều hòa sinh trưởng, còn có một thành phần quan trọng được thêm vào trong môi trường nuôi cấy là các chất phụ gia phức tạp như bột khoai tây, nước dừa, bột chuối, nước ép cà chua, táo, mật ong, nước chiết thịt bò và peptone. Những chất hữu cơ này có hiệu quả đáng kể đối với sự nảy mầm và vi nhân giống của nhiều loài phong lan [2 - 6]. Vì vậy, nghiên cứu này thực hiện với các chất bổ sung hữu cơ sẵn có với giá thành thấp như: bột khoai tây, bột chuối, peptone và nước vo gạo bổ sung vào môi trường nuôi cấy nhằm tìm ra chất bổ sung hữu cơ thích hợp cho quá trình sinh trưởng và phát triển của lan Vân Hài, đồng thời tạo ra được cây giống khỏe mạnh, cũng như góp phần làm hạ giá thành cây giống. 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1. Vật liệu Nguồn mẫu ban đầu là những chồi non lan Vân Hài in vitro có 3 lá với chiều dài lá 2 cm được nuôi cấy tại Phòng Sinh học Phân tử và Chọn tạo giống cây trồng, Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên. Các chất bổ sung hữu cơ: nước dừa non khoảng 4 tháng tuổi (Cocos nucifera); chuối tây xanh thương phẩm (Musa Rastali); khoai tây thương phẩm (Solanum tuberosum); peptone (Himedia Laboratories); nước vo gạo (gạo thương phẩm). Chỉ tiêu theo dõi: số lá, chiều dài lá, số rễ, chiều dài rễ, trọng lượng tươi, hình thái chồi. 2.2. Môi trường nuôi cấy Môi trường nuôi cấy là môi trường SH [7] có bổ sung 0,5 mg/l BA, 0,5 mg/l NAA, 30 g/l sucrose, 9 g/l agar, 1 g/l than hoạt tính, pH = 5,8 và: nước dừa, khoai tây, nước gạo, peptone và chuối vào các nghiệm thức để đánh giá ảnh hưởng của các chất này tới khả năng sinh trưởng và phát triển của lan Vân Hài. 2.3. Điều kiện nuôi cấy in vitro Thời gian chiếu sáng 16 giờ/ngày, cường độ chiếu sáng 2.500 - 3.000 lux, nhiệt độ 25 ± 3 ºC với độ ẩm phòng nuôi là 75 – 85 %. 2.3.1. Khảo sát ảnh hưởng của nước dừa non lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài in vitro Các chồi non của cây lan Vân Hài được cấy trên môi trường SH có bổ sung thêm nước dừa non ở các tỉ lệ khác nhau: 0, 100, 200, 300, 400 và 500 ml/l. 2.3.2. Khảo sát ảnh hưởng của nước vo gạo lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài in vitro Trong nghiên cứu này, nước gạ ... 05 trong Duncan’s test. Hình 4. Nuôi cấy có bổ sung peptone. A: 0 g/l, B: 1 g/l, C: 2 g/l, D: 3 g/l, E: 4 g/l, F: 5 g/l. 3.5. Ảnh hưởng của bột chuối lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài in vitro Bột chuối có hàm lượng fructose, glucose và nitrat cao, khi được bổ sung vào môi trường nuôi cấy làm tăng hàm lượng đường cũng như hàm lượng khoáng của môi trường [39]. Tác dụng kích thích của bột chuối hiệu quả do khả năng ổn định pH của môi trường nuôi cấy [40]. Bổ sung bột chuối vào môi trường đóng vai trò như một chất kháng acid và trung hòa nồng độ acid. Ngoài ra, bột chuối có chứa một hàm lượng lớn như sắt, kali, vitamin B6, B12 và trypthophan thúc đẩy PLBs tăng trưởng [41]. Sau 90 ngày nuôi cấy, kết quả thu được cho thấy có sự gia tăng đáng kể khi hàm lượng bột chuối tăng từ 50 - 100 g/l (Bảng 5) và đạt cao nhất khi bổ sung 100 g/l bột chuối thể hiện qua các chỉ tiêu theo dõi như khối lượng tươi (1,50 g/chồi), chiều dài lá (4,60 cm), chiều dài rễ (4,37 cm) (hình 5C). Kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu của Minea và cộng sự [42] khi bổ sung 100 g/l bột chuối vào môi trường nuôi cấy lan Vanda đã kích thích làm tăng chiều dài chồi và tăng kích thước lá của loài Spathoglottis kimbal-lianai [42]. Bột chuối bổ sung vào môi trường nuôi cấy đã kích thích làm tăng số lượng lá trong nuôi cấy Dendrobium Nobile [43]. Bột chuối của các giống chuối khác nhau bổ sung vào môi trường nuôi cấy có sự kích thích đáng kể lên Ảnh hưởng của các chất b/s hữu cơ lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài 58 quá trình tăng trưởng của PLB, bột chiết chuối Rastali, Rastali và Grand naine khi bổ sung vào môi trường nuôi cấy đã kích thích nhân nhanh PLB và tối ưu tại 100 g/l, trừ Grand naine có hiệu quả tối ưu ở 200 g/l [41]. Trong thí nghiệm của Saranjeet và cộng sự [27], 50 g/l bột chuối chứng tỏ có lợi cho sự phát triển mạnh của chồi Cymbidium pendulum [27]. Các kết quả hiện nay cũng phù hợp với báo cáo của Aktar và cộng sự (2008) cho thấy sự tương tác giữa môi trường ½MS và bột chuối Sabri cho thấy hiệu quả vượt trội về trọng lượng tươi của PLBs Dendrobium [39]. Khi hàm lượng bột chuối tăng trên 150 g/l tất cả các chỉ tiêu theo dõi đều có xu hướng giảm dần, các lá non hầu như không phát triển, lá khằn và đặc biệt có sự hình thành của các chồi bên. Khi hàm lượng bột chuối trong môi trường nuôi cấy quá cao làm ức chế sự phát triển của chồi, có thể do áp lực thẩm thấu của môi trường cao và ngăn chặn sự hấp thu nước và các chất cần thiết cho sự phát triển của chồi. Kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu của Saranjeet và cộng sự [27] khi hàm lượng bột chuối bổ sung vào môi trường cao hơn (75 g/l) đã chứng minh là bất lợi cho sự sống còn của mẫu cấy, các cơ quan như protocorm bị hoại tử và chết ngay sau đó [27]. Tuy nhiên, hàm lượng cao hơn của bột chiết chuối (200 - 300 g/l) có thể ức chế sự tăng trưởng các PLBs Phalaenopsis violacea. Ở hàm lượng cao hơn (200 - 300 g/l) bột chiết chuối Mas làm giảm sự gia tăng tỉ lệ hình thành PLB từ 80 % xuống 70 % và 60 % [41]. Như vậy, chồi non lan Vân Hài sinh trưởng và phát triển tốt nhất trên môi trường SH có bổ sung 100 g/l bột chuối tây, 9 g/l agar, 30 g/l đường, 1 g/l than hoạt tính. Bảng 5. Ảnh hưởng của bột chuối lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài in vitro. Bột chuối (g/l) Chiều dài lá/chồi (cm) Số lá/chồi Số rễ/chồi Chiều dài rễ trung bình/chồi (cm) Khối lượng tươi/chồi (g) Hình thái chồi 0 3,40c* 3,75ab 3,92a 3,22b 1,10c Chồi xanh, nhỏ 50 3,67b 4,50a 4,20a 4,15a 1,35ab Chồi xanh đậm, khỏe mạnh 100 4,60a 4,25ab 4,10a 4,37a 1,50a Chồi xanh đậm, khỏe mạnh 150 3,22b 4,00abc 2,70a 3,12b 1,22bc Chồi xanh nhợt, lá cứng, khằn 200 3,22c 3,50bc 2,47b 2,52c 1,17bc Chồi xanh nhợt, lá cứng, khằn 250 2,37d 3,25c 1,75d 1,62d 0,75d Chồi xanh nhợt, lá cứng, khằn Chú thích: * Những chữ cái khác nhau (a, b, c) trong cùng một cột biểu diễn sự khác nhau có ý nghĩa với α = 0,05 trong Duncan’s test. Vũ Quốc Luận, Trịnh Thị Hương, Nguyễn Phúc Huy, Đỗ Khắc Thịnh, Dương Tấn Nhựt 59 Hình 5. Nuôi cấy có bổ sung bột chuối. A: 0 g/l, B: 50 g/l, C: 100 g/l, D: 150 g/l, E: 200 g/l, F: 250 g/l. 4. KẾT LUẬN Trong 5 chất hữu cơ bổ sung vào môi trường nuôi cấy, chồi non lan Vân Hài in vitro sinh trưởng và phát triển tốt nhất thu được trên môi trường SH có bổ sung 200 ml/l nước vo gạo, 0,5 mg/l BA, 0,5 mg/l NAA, 9 g/l agar, 30 g/l sucrose, 1 g/l than hoạt tính. Hàm lượng các chất bổ sung hữu cơ như: bột khoai tây (100 - 200 g/l), bột chuối 100 g/l hoặc peptone 1 g/l bổ sung vào môi trường SH với 0,5 mg/l BA, 0,5 mg/l NAA, 9 g/l agar, 30 g/l sucrose, 1 g/l than hoạt tính, có thể thay thế cho nước dừa non nhằm mục đích hạ giá thành mà chất lượng cây giống luôn ổn định. Lời cảm ơn: Các tác giả xin chân thành cảm ơn Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên đã hỗ trợ kinh phí cho nghiên cứu này. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Leonid Averyanov, Phillip Cribb, Phan Kế Lộc, Nguyễn Tiến Hiệp - Lan Hài Việt Nam, Nhà xuất bản Giao thông vận tải, 2004. 2. Aktar S., Nasiruddin K. M., Khaldun A. B. M. - Organogenesis of Dendrobium orchid using traditional media and organic extracts, J. Agr. Rural. Dev. 5 (1&2) (2007) 30-35. 3. Arditti J., Abdul K. A. G. - Numerical and physical properties of orchid seeds and their biological implications, New. Phytol. 145 (2000) 367-421. 4. Lee Y. I., Lee N. - Plant regeneration from pro-tocorm-derived callus of Cypripedium formosanum, In Vitro. Cell. Dev. Plant. 39 (2003) 475-479. 5. Lo S. F., Nalawade S. M., Kuo C. L., Chen C. L., Tsay S. H. - Asymbiotic germination of immature seeds, plantlet development and ex-vitro establishment of plants of Dendrobium tosaense Makino- a medicinally important orchid, In Vitro. Cell. Dev. Plant. 40 (2004) 528-535. 6. Malmgren S. - Orchid propagation: theory and practice. dlm: Allen, C. (ed.). North American Native Ter-restrial Orchid: Propagation and Production, North American Native Terrestrial Orchid Conference, Maryland, Ms, 1996, pp. 63-71. 7. Schenk R. U., Hildebrandt A. C. - Medium and techniques forinduction and growth of monocotyledonous and dicotyle-donous plant cell cultures, Can. Bot. 50 (1972) 199-204. 8. Huang L. C., Lin C. J., Kuo C. I., Huang B. L., Murashige T. - Paphiopedilum cloning in vitro, Sci. Hort. 91 (2001) 111-121. Ảnh hưởng của các chất b/s hữu cơ lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài 60 9. Chyuam Y. N., Saleh N. M. - In vitro propagation of Paphiopedilum orchid through formation of protocorm-like bodies, Plant. Cell. Tiss. Org. Cult. 105 (2011)193-202. 10. Chyuam Y. N., Saleh N. M., Zaman F. Q. - In vitro multiplication of the rare and endangered slipper orchid, Paphiopedilum rothschildianum (Orchidaceae), Afr. J. Biotechnol. 9 (14) (2010) 2062-2068. 11. Lin Y. H., Chang C., Chang W. C. - Plant regeneration from callus culture of a Paphiopedilum hybrid, Plant. Cell. Tiss. Org. Cult. 62 (2000) 21-25. 12. Patcharawadee W., Eric B., Kongkanda C., Sureeya T. - Effect of cytokinins (BAP and TDZ) and auxin (2,4-D) on growth and development of Paphiopedilum callosum. Kasetsart. J. Nat. Sci. 45 (2011) 12-19. 13. Vũ Quốc Luận, Nguyễn Phúc Huy, Hoàng Xuân Chiến, Trịnh Thị Hương, Vũ Thị Hiền, Nguyễn Bá Nam, Đỗ Khắc Thịnh, Dương Tấn Nhựt. 2012. Nghiên cứu nhân giống in vitro cây lan Hài (Paphiopedilum callosum), Tạp chí Công nghệ sinh học 10 (3) (2012) 487-494. 14. Overbeek van J., Conklin M. E., Blakeslee A. F. - Factors in coconut milk essential for growth and development of very young Datura embryos, Science 94 (1941) 350-351. 15. Jean W. H., Yong., Liya G., Yan F. N., Swee N. T. - The Chemical Composition and Biological Properties of Coconut (Cocos nucifera L.) Water, Molecules 14 (2009) 5144- 5164. 16. George E. F., Hall M. A., and De Klerk G. J. - Plant Propagation by Tissue Culture. Springer, Dordrecht, The Netherlands 1 (2008) 501. 17. Yong J. W. H., Ge L., Ng Y. F., Tan S. N. - The chemical composition abd biology properties of coconut (Cocos mucifera L.) water, Molecules 14 (2009) 5144-5164. 18. Al-Khayri J. M., Huang F. H., Morelock T. E., Buasharar T. A. - Spinach tissue culture improve with coconut water, Hort. Sci. 27 (1992) 357-358. 19. Boase M. R., Wright S., McLeay P. L. - Coconut milk enhancement of axillary shoots growth in vitro of kiwifruit. New Zealand, J. Crop. Hort. Sci. 21 (1993) 171-176. 20. Maddock S. E., Lancaster V. A., Risiott R., Franklin J. - Plant regeneration from cultured immature embryos and inflorescences of 25 cultivar of wheat (Triticum aestivum), J. Exp. Bot. 34 (1983) 915-926. 21. Mathias R. J., Simpson E. S. - The interaction of genotype and culture medium on the tissue culture responses of wheat (Triticum aestivum L.) callus, Plant. Cell. Tiss. Org. Cult. 7 (1986) 31-37. 22. Nasib A., Ali K., Khan S. - An optimized and improved method for the in vitro propagation of kiwifruit (Actinidia deliciosa) using coconut water, Pak. J. Bot. 40 (2008) 2355-2360. 23. Bhasker J. - Micropropagation of Phalaenopsis. [Ph.D. Thesis.] Thrissur, Kerala Agricultural University, 1996. 24. Shantz E. M., Steward F. C. - Coconut milk factor: The growth promoting substance in coconut milk, J. Amer. Chem. Soc. 74 (1952) 6133-6135. 25. Burnet G., Ibrahim R. K. - Tissue culture of Citrus peel and its potential for flavonoid synthesis, Z. Pflanzenphysiol. 69 (1973) 152-162. 26. Intuwong O., Sagawa Y. - Clonal propagation of sarcanthine orchids by aseptic culture of inflorescences, Amer. Orc. Soc. Bull. 42 (1973) 264-270. Vũ Quốc Luận, Trịnh Thị Hương, Nguyễn Phúc Huy, Đỗ Khắc Thịnh, Dương Tấn Nhựt 61 27. Saranjeet K., Bhutani K. K. - Organic growth supplement stimulants for in vitro multiplication of Cymbidium pendulum, HortScince 9 (1) (2012) 47-52. 28. Abdullahil B. M., Shin Y. K., Elshmari T., Lee E. J., Paek K. Y. - Effect of light quality, sucrose and coconut water concentration on the microporpagation of Calanthe hybrids (‘Bukduseong’ × ‘Hyesung’ and ‘Chunkwang’ × ‘Hyesung’), Aust. J. Cro Sci. 5 (10) (2011) 1247-1254. 29. Trịnh Thị Hương, Trịnh Thị Lan Anh, Huỳnh Kim Thùy My, Vũ Quốc Luận, Nguyễn Văn Bình, Vũ Thị Hiền, Nguyễn Bá Nam, Nguyễn Thị Thúy Hằng, Nguyễn Minh Nhật, Đặng Xuân Thành, Dương Tấn Nhựt - Ảnh hưởng của một số dịch chiết có nguồn gốc thực vật và thời gian cấy chuyền tới quá trình nhân nhanh phôi vô tính lan Hồ Điệp (Phalaenopsis spp.), Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc khu vực phía Nam (2009) 341-346. 30. Mohamed M. A. H., Alsadon A. A., Al Mohaidib M. S. - Corn and potato starch as an agar alternative for Solanum tuberosum micropropagation, Afr. J. Biotechnol 9 (1) (2010) 12-16. 31. Norhayati D., Rosna M. T., Nor N. M. N., Hasimah A. - Provision of low cost media options for in vitro culture of Celosia sp, Afr. J. Biotechl. 10 (80) (2011) 18349-18355. 32. Phùng Văn Phê, Nguyễn Thị Hồng Gấm, Nguyễn Trung Thành - Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi in vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ 26 (2010) 248-253. 33. Chen J. T., Chang W. C. - Effects of tissue culture conditions and explant characteristics on direct somatic embryogenesis in Oncidium ‘Gower Ramsey’, Plant. Cell. Tiss. Org. Cult. 69 (2002) 41-44. 34. Sivakumar G., Yu K. W., Hahn E. J., Paek K. Y. - Optimization of organic nutrients for ginseng hairy roots production in large-scale bioreactors, Curr. Sci. India. 89 (2005) 641- 649. 35. Seyring M. - Einfluss von pepton auf die differenzierung und keimungsomatischer embryonen von cyclamen persicum Mill, BHGL-Schriften-reihe 23 (2005) 119. 36. Nhut D. T., Thi N. N., Khiet B. L. T., Luan V. Q. - Peptone stimulates in vitro shoot and root regeneration of avocado (Persea americana Mill.), Sci. Hort. 115 (2008) 124-128. 37. Hossain M. M. - Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Epidendrum ibaguense Kunth. (Orchidaceae), Afr. J. Biotech. 7 (20) (2008) 3614-3619. 38. Seiki S., Manabu H., Sumio I. - Recovering vitrified carnation (Dianthus caryophyllus L.) shoots using Bacto-peptone and its subfractions, Plant. Cell. Rep. 12 (1993) 370-374. 39. Aktar S., Nasiruddin K. M., Hossain K. - Effects of different media and organic additives interaction on in vitro regeneration of Dendrobium orchid, J. Agr. Rural. Dev. 6 (2008) 69-74. 40. Pierik R. L. M. - In vitro culture of higher plants as a tool in the propagation of horticultural crops, Acta. Hortic. 226 (1988) 25-40. 41. Pavallekoodi G., Xavier R., Uma R. S., Sreeramanan S. - A study on the use of organic additives on the protocorm-like bodies (plbs) growth of phalaenopsis violacea orchid, J. Phycol. 2 (1) (2010) 029-033. 42. Minea M., Piluek C., Menakani T. A., Tantiwiwat S. - A study on seed germination and seedling development of Spathoglottis kimballiani, J. Nat. Aca. Sci. 38 (2004) 141-156. Ảnh hưởng của các chất b/s hữu cơ lên quá trình sinh trưởng và phát triển của chồi lan Vân Hài 62 43. Sudeep R., Rajeevan P. K., Valasalakumari P. K., Geetha C. K. - Influence of organic supplements on shoot proliferation in Dendrobium, J. Hort. Sci. 3 (1997) 38-44. ABSTRACT EFFECTS OF ORGANIC ADDITIVES ON GROWTH AND DEVELOPMENT OF IN VITRO PAPHIOPEDILUM CALLOSUM SHOOT Vu Quoc Luan1, Trinh Thi Huong1, Nguyen Phuc Huy1, Do Khac Thinh2, Duong Tan Nhut1, * 1Tay Nguyen Institute for Scientific Research, Vietnam Academy of Science and Technology 2Institute of Agricultural Science for Southern Vietnam, Vietnam Academy of Agricultural Sciences *E-mail: duongtannhut@gmail.com In this study, in vitro Paphiopedilum callosum shoots cultured at Department of Plant Molecular Biology and Plant Breeding Biology (Tay Nguyen Institute for Scientific Research) were used as source material. P. Callosum shoots with three 2 cm long leaves were cultured on media supplemented with different organic additives in order to find out the most suitable extract for shoot growth and development, to obtain healthy plantlet and to decrease consumer price of seedlings. The supplementation of young coconut water, rice-wash water, potato starch, banana extract, and peptone were investigated. Results showed that kind of organic additive had a great influence on the shoot growth and development. Media supplemented with 200 ml/l rice- wash water resulted in the best growth and development after 90 days of culture. Moreover, these organic additives used as replacements to young coconut water could be applied to reduce costs for media preparation and price of seedlings while vigorous P. Callosum shoot growth and development is achieved. Keywords: coconut water, organic, Paphiopedilum callosum, potato starch, rice-wash water.
File đính kèm:
- anh_huong_cua_cac_chat_bo_sung_huu_co_len_qua_trinh_sinh_tru.pdf